电穿孔是功能强大的将核酸、蛋白及其它分子导入多种细胞的技术。通过高强度的电场作用,瞬时提高细 胞膜的通透性,从而吸收周围介质中的外源分子。这种技术可以将核苷酸、DNA 与RNA、蛋白、糖类、染料及病 毒颗粒等导入原核和真核细胞内。电转化相对其它物理和化学转化方法,是一种有价值和有效的替代方法。
Gene Pulser Xcell 系统的设计,基于Bio-Rad 15 年来在电转化技术上经验积累,它提供指数波和方波波型选择、 系统配置选择及友好的用户界面。
主要特点
- 指数波和方波波型确保细胞类型(原核及真核)均可获得 的电转化效果
- Bio-Rad ***的* PulseTrac 电路和电弧保护设计,确保可重复性 并保护样品
- 模块化设计可根据研究需要选择系统
- 用户友好的数字化界面,具有直观的编程以控制参数, 包括附属模块的参数
- 包括人工操作、预设规程、用户规程、一个优化规程及其它 功能等程序选择
* 美国***4,750,100 和4,910,140。
指数波或方波脉冲选择
Gene Pulser Xcell 系统可产生指数波和方波波型,使你选择较 适合你细胞的波型与规程。指数波和方波均能有效地用于电转化及 电融合。电穿孔波型对不同类型细胞的转化效率有很重要的影响。
左,指数衰变脉冲。当一个充电至电压为V 0 的电容器放 电到细胞,加在细胞上的电压随时间以指数方式下降。从 起始电压下降到V0 / e 所需的时间称为为时间常数τ, 一 种方便的脉冲时间表达方式。
右,方波脉冲。放电到样品后截断电容器脉冲可产生方 波脉冲。脉冲时间为细胞被放电的时间。方波设备都 会产生细微的电压下降。这种电压下降称为脉冲下垂,并 以起始电压的百分比计量。
PulseTrac 电路和电弧保护提供可靠的、可重复的和安全的性能
Bio-Rad 的***微处理器控制电路能为任何规程提供可重复的结果,无论使用何种介质,它所产生的电压 值可在全范围内测试。PulseTrac 电路和电弧保护:
- 确保电压准确地传送到电击杯
- 把CE 模块中的低压电容器度从20% 提升到10%
- 便于电容器再校正,以保持的脉冲指标,修正电容器随着时间而发生的偏移
- 提供脉冲前样品电阻测量
- 当脉冲或电路中断时,可安全地自动放电
- 降低电弧危险,保护设备及样品
用户友好界面,便于编程和控制
主单元上的图形界面可控制包括任何连接的附属模块在内的功能。界面由一个通过功能键和字母数字键盘 操作的屏幕组成。根据屏幕提示进行简便而直观的编程。屏幕用于编程和显示储存与设定的程序、运行参数以及波 型。规程包括:
- 人工编程以输入或编辑方波或指数衰变脉冲的参数
- 辅助编程需要的时间常数
- 预设有适合常用细菌、真菌和哺乳动物细胞株的优化程序
- 优化规程
- 根据不同的波型选择,显示时间常数、实际电压、脉冲间隔和脉冲时间等参数
- 储存和调用前100 个实验的脉冲参数
预优化规程,可快速选择程序
这项功能为每个细胞株提供一组的预优化参数。
提供以下细胞株的预设程序
哺乳动物 |
细菌 |
真菌 |
CHO |
Escherichia coli |
Saccharomyces cerevisiae |
COS-7 |
Agrobacterium tumefaciens |
Pichia pastoris |
3T3 |
Pseudomonas aeruginosa |
Candida albicans |
293 |
Staphylococcus aureus |
Schizosaccharomyces pombe |
HeLa |
Bacillus cereus |
Dictyostelium discoideum |
BHK21 |
Streptococcus pyrogenes |
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A549 |
Lactobacillus plantarum |
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CV1 |
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K562 |
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HL60 |
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Jurkat |
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HuT78 |
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这些细胞株的详细参数及制备电感受态细胞的详细信息可查询Gene Pulser Xcell 系统指导手册或 discover.bio-rad.com 网站。
选择你所需要的系统
Gene Pulser Xcell 是由一个主单元、2 个附属模块(CE 与PC 模块)及ShockPod 电击槽组成的模块式电穿 孔系统。CE 模块与Gene Pulser Xcell 主单元配合使用可电转化多数真核细胞(包括哺乳动物细胞和植物原生质 体)。PC 模块建议用于细菌和真菌的电转化,或其它需要在小体积和高电阻样品上施加高电压脉冲的应用。系统有 3 种组合。
Gene Pulser Xcell 选择系统
系统 |
内容 |
Gene Pulser Xcell 完全系统 |
完全系统包括PC 模块和CE 模块,具有用指数波或方波脉冲转化真核与原核细胞的完整功能。 |
Gene Pulser Xcell 真核系统 |
真核系统由主单元及CE 模块组成,可电转化哺乳动物细胞和植物原生质体。CE 模块具有25-3,275 µF 跨度,提供了一种通过增加脉冲时间常数来控制电路电容的方法。对于方波脉冲,CE 模块能提供从传送方波脉冲到低电阻介质所需的大电容。 |
Gene Pulser Xcell 微生物系统 |
微生物系统由主单元及PC 模块组成,可电转化细菌和真菌,或其它需要在小体积和高电阻样品上施加高电压脉冲的应用。通过将电阻器与样品并联放置,PC 模块可控制电路电阻,从而提供了一种减少指数衰变脉冲时间常数的方法。 |
ShockPod 电击槽可更简单快速地处理样品
创新的ShockPod 槽设计适合单手操作,可快速而简便地单手操作一个电 击杯。只需抓住ShockPod 前部就能打开槽盖。电击杯狭槽的设计可确保电击 杯只能以正确的方向插入。
ShockPod 拥有安全的联锁装置,避免ShockPod 打开时脉冲传送到电 击杯。