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bio-rad伯乐 CHEF 基因组DNA插块试剂盒

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  • 简介:【介绍】 CHEF 基因组DNA 插块试剂盒为PFGE 制备完整 的染色体大小的DNA 提供了方便。对于如此大的分子, 机械抽提会产生DNA 机械剪切, 导致了不好的PFGE 分离效果。要解决这个问题,通过将全细胞包埋于琼 脂糖中进行裂解和去蛋白质,较终获得完整的纯化 DNA...

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 【介绍】

CHEF 基因组DNA 插块试剂盒为PFGE 制备完整 的染色体大小的DNA 提供了方便。对于如此大的分子, 机械抽提会产生DNA 机械剪切, 导致了不好的PFGE 分离效果。要解决这个问题,通过将全细胞包埋于琼 脂糖中进行裂解和去蛋白质,较终获得完整的纯化 DNA。Bio-Rad 提供3 种试剂盒,分别用于制备细菌 (溶菌酶敏感)、哺乳动物的基因组DNA 及酵母染色体 (YACs)。每个试剂盒包括制备100 个插块所需要的酶、 反应缓冲液和限制性酶切CleanCut 琼脂糖,也包括一 次性插块模和屏蔽帽以简化插块处理。每个试剂盒都 经过严格测试,保证所制备的基因组DNA 能被限制性 酶切并可在CHEF 电泳系统中分离。

分离E.coli 染色体酶切片段。 泳道1 和14,S.cerevisiae 染色体;泳道2 和13,λ 分子 量梯度;泳道3-6,DH5 alphaF' 染色体DNA 的NotI 消化物(泳 道3);HB101( 泳道4 );MC 1061(泳道5);MV 1190 (泳道 6)。泳道8-11,DH5 alphaF' 染色体DNA 的SfiI 消化物( 泳道 8);HB101( 泳道9 );MC1061( 泳道10 );MV1190 ( 泳道 11)。DNA 片段在0.5 x TBE, 14°C, 6 V/cm (200 V),120° 角 度,2.77–26.32 秒线性转换时间梯度,于1.0% 脉冲场 Certified 琼脂糖凝胶上分离。

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