IX71,IX81系列研究倒置显微镜

奥林巴斯IX2倒置显微镜与崭新的UIS2 光学系统相结合，开创了活细胞成像的新。
　　随着新的荧光技术开发，光激发和操作的方法在活细胞实验中日益普及，越来越多的研究人员要求在传统的可见光谱外使用光损伤较小的近红外光谱。奥林巴斯公司在IX2系列显微镜上使用了崭新的UIS2光学系统，恰如其分地适应了这类要求。这种新型的光学系统有着的信噪比，在更宽的波长范围内消除色差，有着平坦的高透射率。该系统建立了全新的荧光性能标准，不必损伤细胞，就能有效地检测到微弱的荧光信号，并且优化了多色观察。IX2倒置显微镜能够在超宽光谱上生成的高质量图像，是广大研究人员进行活细胞观察的理想选择。

UIS2 光学元件具有较大的信噪比和用于活细胞荧光成像的光学性能

超高的信噪比，能够得到的图像
　　崭新的UIS2物镜的信噪比优越，高于现有物镜50%。这种物镜的新特性还包括精选了低自发荧光玻璃（通过全反射鍍膜和连接材料，显著减少了自发荧光），提高了数值孔径，增强了信号亮度。UIS2系统在弱激发光下，能够有效探测极弱荧光，从而建立了活细胞荧光成像的新标准。

 

物镜 UPLSAPO/100XO 荧光激发块 U-MNIBA3

物镜 UPLAPO/100XO 荧光激发块 U-MNIBA2

 

 

高数值孔径物镜，用于荧光成像
　　用于UIS2系统的两种新物镜有：PLAPON60XO，它的数值孔径为1.42，较适合荧光成像；UPLSAPO100XO，适合用途。这两种物镜都有很高的荧光信噪比，而且都能够在45mm齐焦距下有非常好的UV激发效果。UPLSAPO100XO能够提供直到340nm的高透过率。

拥有更宽波长范围内的高透过率
　　IX2系列的内置物镜采用UW多层鍍膜技术，能够有效消除超宽谱带上的反射，在可见光到近红外光的波长范围内能够实现平坦的高透过率，在近红外和紫外范围内的透过率显著提高。总之，在较宽波长范围内的性能使它非常适合当今较需要的研究用途。

有效消除直到近红外范围的色差
　　较高的UIS2物镜是UPLSAPO系列，它杰出的超复消色差特点有效地消除了从可见光谱直到1000nm范围内的色差。这意味着从紫外到红外范围内的成像都可以只用一个物镜实现。这一系列物镜在使用覆盖很宽谱带的荧光进行多色观察时，可以获得出色的清晰图像而不产生颜色偏移。

双层多光口设计保证了输入/输出灵活性

• 后上光口
  后上光口不改变载物台高度，所以不影响镜架稳定性
  这一光口可做光路输入口，可装一个附加荧光照明器
   
• 右侧光口
  右侧光口装置（IX2-RSPC-2:可选件，视场数：16）带有一个结像透镜，可以安装一个C型接口CCD照相机。
   
• 后下光口
  能够安装冷CCD DP30BW与同类设备。
  
• 左侧光口
  在这一光口上，原始图像平面距显微镜镜架102mm，具有很大的灵活性，用以安装滤色镜转盘或者超低0.25X或5X照相机适配器。
  与双光口视频适配器结合，能够获得两个原始图像。（可选件）
   
• 底光口
  使用IX2-TVR （T型接口），获得原始图像。
  

双层光学设计同时兼容近红外
双层结构的内部设计有平行光束的输入输出以及多光口结构，用以获取原始图像。为了让光谱范围尽可能地较大，每层的光路分支都兼容近红外光谱。即使同时使用多个光口，载物台高度也不变化。因此，系统的稳定性和照明性能保持不变。

提高了近红外透过率
　　IX2系列采用UIS2 光学系统，提高了侧光口、后光口和底光口的红外透过率，能够提供多方面的高性能，以适应未来研究的需要。

高主机性能
捕捉高清晰度原始图像
　　使用平行光束后，光线可以从后上光口或右侧光口捕捉或传递。由于UIS2光学系统不需要额外补偿（即，补偿只通过物镜透镜进行），所以能够捕捉到清晰的原始图像。*
* “原始图像”是指光线通过物镜后聚焦生成的个图像。没有光线质量损失，也没有图像变差。

V形光路，降低光线损失
　　为了把反射时的光线损失减少到较小程度，采用了简单的V形光学结构。这种结构将显微镜内部的反射减少到仅仅一次，降低了光线损失，能够观察到非常微弱的荧光信号。
热补偿延迟透镜组件：用于观察光路的热补偿延迟光学元件，包含带有不同热特性的组合透镜，能够补偿温度变化造成的模糊

阻止热膨胀，避免模糊的方法
　　外接电源：在长时间段延时观察，环境温度变化或者从空调中吹出的空气将会使显微镜产生一些热形变。由于这种形变会造成模糊，IX2系列设计组对这个问题投入了的关注。应对措施包括将透射光照明电源放置到显微镜外部，这就减少了内部产生的热形变，将模糊程度降低到传统模块的七分之一。提供各类附件以稳定长时间段的延时观察，例如恒温培养箱。

镜体高度稳定
　　为了将各个区域的稳定性较大化，奥林巴斯公司简化或缩短了从聚焦装置到物镜转换的结构，这就将图像传输阶段的扭曲减至较小。在使用物镜校正环或诺马斯基DIC 滑板时顺理成章地防止了模糊。

 

镜体小巧，便于操作
　　由于镜体设计小巧，空间足以在显微镜上设计两侧光口，底光口以及后光口，留下的两侧区域足以很方便地安装各类周边设备。使用工具，显微镜可以安装到一个防震镜座上，取下显微镜后面的扩展支架后，显得更加小巧玲珑。

可变倾角双目观察筒U-TBI90
　　可变倾角双目观察筒带有35—85度倾角。不使用时，观察筒可以向上翻起并收好，以免突出桌子边沿。可变倾角观察筒可以让每一个使用人员根据个人情况选择较轻松的观察姿势，同时也可以站立观察。

无须聚焦的校正环
　　新开发的LUCPLFLN40X（N.A. 0.6, W.D.3.4mm☆）和LUCPLFLN60X（N.A. 0.7, W.D. 1.5---2.2mm）适用于任意厚度的容器。在校正由不同厚度容器所造成的球差时，转动校正环不会使聚焦变模糊。校正操作简单，优化了观察图像。*：使用1mm厚度容器时。

LUCPLFLN40X 
转动校正环不会使聚焦变模糊。

使用传统带校正环物镜时
转动校正环时，聚焦变模糊

[浸油防护功能]
避免浸油渗到物镜顶端

[变倍器]
无需更换物镜，就可以在1X和1.6X之间改变放大倍率。可选2X附件。

[玻璃载物台插入板IX2-GCP]
物镜的类型和放大倍率可以很容易地从载物台表面确定。物镜采用标准放大倍率色标，很容易确定。

[荧光指示标志]
使用发光标签，在暗室内很容易认出。

[荧光转盘确定窗口]
光路中的荧光激发块组件很容易从观察筒的左右目镜间确认。

新的荧光系统

信噪比提高，能够有效检测到非常微弱的荧光

信噪比更高，在荧光观察时，能够输出更明亮、反差更高的图像
　　为了大程度地减小细胞损伤或荧光衰减，理想的显微镜应该在较小激发光下进行明亮的、高反差的荧光观察。为了有效检测到微弱的荧光信号，必须降低杂散光的噪音。信噪比越高，弱激发光下的观察图像越明亮、越清晰。

• 增强信号的方法 
  ①高数值孔径的荧光物镜。
  ②与单荧光波长特性相吻合的滤色片
• 降低噪声的方法 
  ①无自发荧光的物镜
  ②使用不产生荧光光谱交叠的激发和发射滤色片组合。
  ③能阻止杂散光进入的光学系统
  ④能减少自发荧光的环形狭缝照明

荧光观察组件
低自发荧光高信噪比物镜 
　　①使用人员除了可以选择PLAPON60XO 物镜（出色的数值孔径为1.42）,还可以选用大量的其它高数值孔径的物镜，这类物镜自发荧光小，精选玻璃，有助于提高信噪比。

 

物镜	数值孔径	工作距离(mm)
UPLSAPO 10X	0.40	3.1mm
UPLSAPO 20X	0.75	0.6mm
UPLSAPO 40X	0.90	0.18mm
UPLSAPO 60XO	1.35	0.15mm
UPLSAPO 100XO	1.40	0.13mm
PLAPON60 XO	1.42	0.15mm
UPLFLN40XO	1.30	0.2mm
LUCPLFLN 20X	0.45	6.6 — 7.8mm
LUCPLFLN 40X	0.60	2.7 — 4mm
LUCPLFLN 60X	0.70	1.5 — 2.2mm

 

用于荧光蛋白质的高性能荧光组件 
　　②这一荧光激发块组件优化了ECFP/EGFP/EYFP/DsRed波长特性，能够提供高锐利的光谱分割和高透过率，可以让使用人员快速有效地从荧光蛋白中检测到荧光。即使在弱激发光下，也能进行明亮观察，从而减少了荧光衰减，也大程度地减少了对样品的损害。

高性能干涉镀膜荧光激发块组件 
　　③由于采用了新的镀膜技术，激发和发射之间的间隙减少6nm，因此，某些干涉镀膜荧光激发块组件的信噪比也提高了。这类荧光激发块可有多种选择，其中包括新型的IGA型荧光激发块组件。

高性能荧光激发块

　　新型荧光激发块中分光镜的高锐化镀膜将激发滤色片的交叉减少到较小，并且将激发光的损失减少到传统模块的十分之一以下。与光线吸收装置（可吸收99%以上的杂散光）组合使用，能够提高信噪比，而不需要任何防止激发光损失的设备。

荧光激发块组件都带有杂散光降噪功能。 
④强噪声的一个来源是非常微弱的激发光（杂散光）不经分光镜反射就发生透射。IX2系列荧光激发块组件带有可吸收99%以上这种杂散光的装置。

环形狭缝照明装置，降低了噪声/IX2-RFRS 
　　⑤自发荧光产生于透镜中心，导致光噪声的产生。但是，这种自发荧光可以通过在反射光照明孔径光阑上放一个环形狭缝来降低。这种环形狭缝只允许激发光通过物镜孔（信噪比提高1.2到3倍）。这种装置很容易安装到IX2-RFAL上，只需要简单地更换环形狭缝装置（视场数11），就可以兼容40X、60X和100X油镜。

 

Illumination	Normal	Annular
SIGNAL	408	479
NOISE	36	18
S/N	11.3	26.6

 

玻璃反射器捕捉多重染色剂荧光 
⑥多带分光镜通常用于在激发和吸收一侧使用滤色镜转盘时，获取多重染色荧光样品的多色图像。但这种分光镜会碰上这样一个问题，那就是，由于染色剂数目增加，每种荧光图像都会变暗，这是因为透过光谱变窄，透过率在状态下也要降低到90%以下。因此，奥林巴斯公司开发了与波长无关的的反射器，能够在从430nm到700nm的宽波长范围中具有94%的高透过率。与激发和发射一侧的滤色镜转盘共同使用时，就可以使用多种染色剂，更有效地捕捉荧光图像。☆ 正在申请***



大量附件，能够进行各种各样的荧光成像



荧光照明光源，明亮激发照明，用于细胞观察/操作
　　奥林巴斯系列荧光照明装置适合广泛的需要，包括多重染色荧光、比例法测量（Ratio）、光漂白及解笼锁（uncaging）观察。低放大倍率性能已经大为提高，金属卤化物系统带有预对中的长寿命灯泡选项。

 

Lamp housings
Model	Asphericaloptics*1	Apochromaticlens*2	Averagelamp life	Lampcentering	IRillumination
100W mercury apo lamp housing/ U-LH100HGAPO			300h	Required	Good
100W mercury lamp housing/ U-LH100HG			300h	Required	Good
75W xenon apo lamp housing/U-LH75XEAPO*3			200h	Required	Excellent
50W metal halide lamp housing/ U-LH50MH			2000h	Not required	N/A

☆1 比起传统消球差光学元件，能够更有效集光。
☆2 均匀照明，灯泡聚焦不偏移，即使改变激发光波长。
☆3 由于采用平坦光源光谱，适合多重染色荧光或比例法成像。

 

 

多种反射光荧光照明器供选择
[L形荧光照明器IX2-RFAL]
　　这种L形照明器比以前产品能够提供两倍亮度，带有可拆卸的孔径和视场光阑插件，还带有能准确进行灯室对中的装置，有着较大的系统灵活性。



[荧光照明器IX2-RFA]
　　比起以前产品，在低放大倍率下，有着2.4倍的亮度（在10X物镜下进行比较）。这种照明器对于需要强激发光的用途，或者对于低放大倍率荧光观察非常理想，内置视场光阑。



[双光室照明器/IX2-RFAW]
　　同时使用两个光源，观察时可以进行光增强。



[双灯室附件U-DULHA]
　　这一适配器允许使用人员同时加装不同类型的光源，并根据用途交替使用。
IX2-RFA用做反射光荧光照明器。
（光路选择：100/0，0/100，视场数11）



照明器模块组件
[方形视场光阑U-RFSS]
　　这种特的光阑允许使用人员在视场内的任何地方控制一个荧光激发区域。例如，光漂白和光毒性能够仅***制在需要CCD成像的区域，提高了整体亮度，也延长了长时间观察的细胞的寿命。这种光阑安装在荧光照明器IX2-RFAL的视场光阑位置。



[针孔光阑IX2-RFSPOT]
　　这种装置能够对荧光样品提供点状光照明，对于许多实验都是很有用的，如FRAP，Uncaging等。
这种光阑安装在L形荧光照明器IX2-RFAL的视场光阑位置。
* 使用市售针孔板。
  
红外CCD适配器
　　这些低放大倍率CCD适配器安装在左侧光口，覆盖从可见光到近红外光的波长范围。



新的微分干涉（DIC）系统
诺马尔斯基DIC 显微镜的简单原理
　　光线穿过特殊媒介（例如，水 ）中带有不同折射率的物质（例如，细胞）时，会产生相差。诺马尔斯基DIC 利用这种相差增强反差。来自显微镜光源的光的波动方向与起偏器（聚光镜侧）的光一致，当其通过聚光镜侧的DIC 棱镜时，就分为直角正交的两个束光。分裂距离称做裂劈间隙。当这两束光线通过带有不同折射率（例如，细胞）的媒介时，其中一束会发生延迟；而这两束光被DIC 滑板（观察筒侧）和检偏镜重组时，干涉效应就会产生反差。这就是诺马尔斯基DIC 的原理。



奥林巴斯公司已经根据裂劈间隙为各种样品开发出了理想的DIC 棱镜。当DIC 反差低时，样品很难观察，由于有强烈眩光，高反差也会干扰观察。因此，奥林巴斯公司开发了三种不同类型的DIC 棱镜，能够对各种样品进行清晰的观察。

诺马尔斯基DIC系统在活细胞观察中能够提供分辨率或高对比度
　　活细胞样品的厚度从C.elegans之类的线虫到单层细菌细胞之间变化，这就需要DIC也能随高反差的厚样品或几乎不可见的薄细胞而变化。奥林巴斯提供三种DIC 系统，每种的微分间隙都不一样。DIC 棱镜在光通过时，微分间隙越大，则较终图像的反差程度越大。对于厚样品，小断层、高分辨